| biotechn. | dideoxy-sequencing | дидезокси-метод установления первичной структуры ДНК (метод Сэнгера, в котором синтез комплементарной цепи осуществляется на однонитевой ДНК-матрице с помощью затравки, фрагмента Клёнова, ДНК-полимеразы I, четырёх дезоксинуклеозидтрифосфатов и меченого, напр., α-Р32, дидезоксинуклеозидтрифосфата. Включение дидезоксинуклеозида в каждое соответствующее принципу комплементарности положение останавливает синтез ДНК. Полученный набор меченых полинуклеотидов разделяется по длине электрофорезом в денатурирующем ДНК полиакриламидном геле. Таким образом, в четырёх независимых экспериментах определяется положение каждого из четырёх нуклеотидов в цепи @ДНК.) |