fluorescent probe opt.

[marikom]

Many subjects in microscopy have very low inherent contrast. Living cells, for example, are largely translucent and not strongly colored making it difficult to distinguish specific features. Creating contrast in a specimen enables the observer to identify key structures. This can be achieved either through the manipulation of illumination or by the addition of probes targeted at specific features. Examples of illumination techniques to create contrast include darkfield, phase contrast, oblique illumination, DIC and polarized light. These take advantage of differences in refractive indices, relief, and anisotropy between different parts of the specimen. Probe techniques include the use of targeted histological stains to create color contrast and fluorescent probes to 'light up' key molecules and structures when excited with light of the appropriate wavelength. In fluorescence imaging, filter blocks are used to (ideally) allow only selected wavelengths of light to reach the detector so that fluorescence light is contrasted against a black background. Stray light in the system can reduce this contrast and compromise imaging especially in situations where fluorescence emission is weak. Several fluorescent probes with different emission spectra can be used to identify multiple structures in a specimen as long as emissions can be cleanly differentiated. Overlapping spectra may be resolved either through spectral imaging or by the use of fluorescence lifetime as a contrast parameter.

Многие объекты микроскопии обладают очень малым собственным контрастом. Например, живые клетки являются по большей части прозрачными и не обладают ярко выраженным цветом, за счет чего сложно различить определенные свойства. Контрастирование образца дает наблюдателю возможность, идентифицировать ключевые структуры. Это может быть достигнуть либо путем манипуляций с освещением, либо путем добавления ??.Примеры методов освещения для создания контраста включают в себя темное поле, фазовый контраст, косое освещение, ДИК и поляризованный свет.В них используется разница в показателях преломления, рельефе и анизотропии между различными частями образца. ?? включают в себя использование нацеленных?? гистологических мазков для создания цветового контраста и флуоресцентных образцов? для "освещения" ключевых молекул и структур, когда они освещаются излучением определенной длины волны. При получении флуоресцентных изображений блоки светофильтров используются для того, чтобы позволить только определенным длинам волн света достичь приемника, так что флуоресцентный свет контрастируется по сравнению с черным фоном. Паразитные засветки в системе могут снизить этот контраст и ухудшить качество изображения, особенно в ситуациях со слабой флуоресценцией. Для идентификации нескольких структур образца могут использоваться несколько флуоресцентных ?? с различными спектрами испускания, в том случае, если можно четко различить разные эмиссии?. Накладывающиеся спектры могут быть ?? либо с помощью спектральной методики, либо с помощью использования времени жизни флуоресценции как параметра контраста.

Что такое probe? Раньше я думал, что это то же самое, что образец, но тут sample - образец, а probe?

[Игорь_2006]

"флуоресцентный зонд" обычно в таких случаях говорят.

... либо добавлением флуоресцентных зондов, нацеленных на специфические мишени.

Использование зондов включает применение специфических гистологических красителей для получения цветового контраста и флуоресцентных зондов для "подсвечивания" ключевых молекул и структур при облучении их светом соответствующей длины волны.

Можно использовать несколько флуоресцентных зондов с различным спектром эмиссии для одновременного выявления ряда различных структур. Их количество ограничивается тем, насколько четко дифференцируются длины волн их эмиссии. Проблему перекрывания спектров можно разрешить либо спектральным анализом, либо использованием флуоресцентных агентов с разной продолжительностью жизни в качестве контрастного параметра.