Crosstalk Crossover / Spectral Overlap opt.

[marikom]

Crosstalk Crossover / Spectral Overlap

Crosstalk can occur during both excitation and emission of different fluorescent proteins and is usually observed by the emission of one fluorophore being detected through the photomultiplier channel or filter combination of another fluorophore. This can be a problem in image interpretation, for example, in co-localization studies and/or quantitative studies. Crossover in excitation tends to occur increasingly towards shorter wavelengths while crosstalk in emission is skewed towards longer wavelengths. Multicolor imaging of fluorescent proteins might, therefore, proceed with the longest wavelength emission probe imaged first, using excitation wavelengths that do not crossover to shorter wavelength probes.

Перекрестные помехи могут происходить куак во время возбуждения, так и во время испускания излучения различных флуоресцентных белков и обычно наблюдается, когда испускание одного флуорофора обнаруживается каналом ФЭУ или комбинацией светофильтров другого флуорофора?????. Это может представлять собой проблему при интерпретации изображений, например, при исследовании процессов солокализации и/или квантитативных исследованиях. Перекрестные помехи в возбуждении?? обычно возникают в большей степени при более коротких длинах волн, в то время как перекрестные помехи в испускании?? появляются при более высоких длинах волн.Следовательно, формирование многоцветных изображений флуоресцентных белков может начинаться с получения изображения зонда с самой большой длиной волны испускания????????? с использованием длин волн возбуждения, которые не пересекаются с зондами более коротких длин волн.

Ничего не понял. Помогите пожалуйста разрешить вопросы! Спасибо!